Microscopic Methods in Microbiology

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Microscopic pamamaraan ng pananaliksik mga paraan upang galugarin ang isang iba't ibang mga bagay na may ang paggamit ng mga espesyal na kagamitan. Ito ay nagpapahintulot sa amin upang isaalang-alang ang istruktura ng mga sangkap at mga organismo, ang magnitude ng kung saan ay lampas sa limitasyon ng resolution ng ang mata ng tao. Ang artikulong ito ay nagbibigay ng isang maikling analysis ng microscopic pamamaraan.

Pangkalahatang-ideya

используют в своей практике разные специалисты. Modern paraan ng mikroskopiko pagsusuri gamit ang iba't ibang mga eksperto sa kanilang mga kasanayan. Kabilang sa mga ito ay ang mga virologists, saytolohiya, hematology, morpolohiya, at iba pa. Ang pangunahing paraan ng mikroskopiko pagsusuri ay kilala para sa isang mahabang panahon. Ang una ay magaan paraan sa pagtingin sa mga bagay. Sa mga nakaraang taon, aktibong ipinakilala sa pagsasagawa, at iba pang mga teknolohiya. . Kaya, ang pagiging popular ng nakuha phase-kaibahan, luminescent, pagkagambala, polariseysyon, infrared, ultraviolet, stereoscopic paraan ng pananaliksik. Lahat ng mga ito ay batay sa isang iba't ibang mga katangian ng liwanag. . Sa karagdagan, malawakang ginagamit elektron mikroskopya pamamaraan. Ang mga pamamaraan payagan ang display bagay gamit ang isang itinuro daloy ng sisingilin particle. Dapat ito ay nabanggit na ang mga pag-aaral pamamaraan ay ginagamit hindi lamang sa biology at gamot. в промышленности. Lubos na popular na paraan ng microscopic pag-aaral ng riles at alloys sa industriya. Nagbibigay-daan ito sa pag-aaral upang masuri ang pag-uugali ng compound upang lumikha ng mga teknolohiya upang mabawasan ang posibilidad ng bali at nadagdagan lakas.

Banayad na paraan: katangian

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Ang ganitong mga microscopic mga pamamaraan para sa pag-aaral ng microorganisms at iba pang mga pasilidad batay sa iba't ibang resolution kagamitan. Isang mahalagang kadahilanan sa ito ay ang direksyon ng beam na mga katangian ng ang bagay mismo. Ang huli, sa partikular, ay maaaring maging transparent o opaque. Alinsunod sa ang mga katangian ng mga bagay, ang pagpapalit ng pisikal na katangian ng liwanag flux - ang liwanag at kulay dahil sa ang malawak at ang haba ng daluyong, eroplano, phase at direksyon ng alon paghahayupan. . Sa paggamit ng mga katangian at bumuo ng iba't ibang mga microscopic pamamaraan.

pagtitiyak

Upang pag-aralan ang mga paraan ng liwanag na mga bagay, karaniwan ay stained. Ginagawa nitong posible upang kilalanin at ilarawan ang mga ito o iba pang mga ari-arian. Ito ay kinakailangan na ang tissue ay naayos na, dahil sa ang pangkulay magbunyag ng ilang mga istraktura ng eksklusibo sa mga cell namatay. Sa buhay na mga cell paghiwalayin ang isang tinain sa anyo ng mga vacuole sa cytoplasma. Hindi niya paints sa ibabaw ng kaayusan. Ngunit sa live na mga bagay at maaaring masiyasat ang paggamit ng isang ilaw mikroskopyo. Para sa layuning ito, mahalagang paraan ng pag-aaral. Sa mga naturang kaso, ang isang darkfield condenser. Ito ay naka-embed sa light microscope.

Pag-aaral unpainted bagay

Ito ay natupad sa pamamagitan ng phase-kaibahan mikroskopya. Ang pamamaraan na ito ay batay sa ang pagdidiprakt ng beam alinsunod sa mga katangian ng ang bagay. Sa panahon ng exposure minarkahan pagbabago sa phase at wavelength. Sa microscope lens ay naroroon translucent plato. Live o nakapirming, ngunit hindi painted na mga bagay dahil sa linaw nito, halos hindi baguhin ang kulay, at ang malawak ng ang beam dumadaan sa kanila, na minungkahi lamang ng isang shift sa mga wave phase. Ngunit sa kasong ito, pagkatapos ng pagpasa sa pamamagitan ng mga bagay, ang liwanag flux pinalihis ng plato. Bilang isang resulta, sa pagitan ng mga beams, nawawala sa pamamagitan ng object at pumasok sa isang light background, wave haba pagkakaiba ay nangyayari. Sa isang tiyak na halaga ng kanyang visual effect ay nangyayari - ang madilim na object ay malinaw na nakikita sa isang ilaw na background, o vice versa (alinsunod sa mga katangian ng isang phase plate). Upang makakuha ng pagkakaiba na ito ay dapat na hindi bababa sa 1/4 wavelength.

Anoptralny paraan

Siya ay isang uri ng phase-contrast paraan. Anoptralny Ang pamamaraan ay nagsasangkot ng paggamit ng isang lens na may espesyal na mga lamina, na baguhin lamang ang kulay at liwanag ng ilaw sa paligid. Ito lubhang nagpapalawak sa mga posibilidad ng pag-aaral walang bahid buhay na mga bagay. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied phase contrast mikroskopyo pamamaraan sa pananaliksik sa mikrobiyolohiya, parasitology sa pag-aaral ng halaman at hayop na mga cell, protosowa. Sa ang paraan hematology ay ginagamit upang makalkula at matukoy ang pagkita ng kaibhan ng mga cell ng dugo at utak ng buto.

pamamaraan panghihimasok

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Ang mga microscopic pamamaraan ng pananaliksik sa pangkalahatan malutas ang parehong mga problema tulad phase contrast. Gayunpaman, sa huli kaso, eksperto ay maaari lamang sundin ang mga contours ng mga bagay. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Ang panghihimasok microscopic pamamaraan ng pananaliksik-daan sa amin upang pag-aralan ang kanilang mga bahagi, magsagawa ng isang nabibilang na mga elemento ng pagtatasa. Ito ay posible dahil sa ang paghahati ng light beam. Isa stream ay ipinapasa sa pamamagitan ng mga butil na bagay, at ang iba pang - sa pamamagitan ng. Sa eyepiece ng mikroskopyo matugunan nila at makagambala. Ang resultang phase pagkakaiba ay maaaring tinutukoy sa pamamagitan ng bigat ng iba't ibang mga cellular istraktura. Kapag sunud pagsukat ay may mga paunang-natukoy na repraktibo index ay maaaring itakda makapal unfixed tisiyu at living object, ang mga protina na nilalaman sa ganyang bagay, ang konsentrasyon ng solids at tubig, at iba pa. Alinsunod sa mga natanggap na mga espesyalista data ay magagawang direkta suriin ang lamad pagkamatagusin, enzyme aktibidad, cell metabolismo.

polariseysyon

Ito ay isinasagawa sa pamamagitan ng Nicol prisms o filmy polaroids. Ang mga ito ay nakalagay sa pagitan ng specimen at ang liwanag na pinagmulan. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarizing mikroskopya pamamaraan ng pananaliksik sa mikrobiyolohiya ay nagbibigay-daan sa amin upang mag-aral ng mga bagay sa inhomogeneous properties. Sa isotropic istruktura ang bilis ng pagpapalaganap ng liwanag ay independiyente sa mga napiling eroplano. Sa anisotropic systems rate ay nag-iiba ayon sa liwanag na nakatuon sa kahabaan ng pahalang o paayon axis ng object. Kung ang repraktibo index halaga sa kahabaan ng istraktura ay magiging mas malaki kaysa sa kahabaan ng pahalang, ay lumilikha ng isang positibong double repraksyon. Ito ay tipikal ng maraming mga biological mga bagay na nakita ng isang mahigpit na molekular orientation. Lahat sila ay anisotropic. Sa kategoryang ito, sa partikular, ang myofibrils, neurofibrils, pilikmata sa may pilikmata epithelium, collagen fibers, at iba pa.

polariseysyon halaga

Ang paghahambing sa likas na katangian ng radiation at ang repraktibo index Anisotropy ng bagay ginagawang posible upang matantya ang molekular istraktura ng organisasyon. Polariseysyon pamamaraan ay nagsisilbi bilang isa sa mga histological pagsusuri pamamaraan na ginagamit sa saytolohiya at iba pa. Hindi lang pininturahan bagay ay maaaring aral sa liwanag. Polariseysyon pamamaraan ginagawang posible upang suriin ang walang bahid at unfixed - katutubong - paghahanda ng mga seksyon tissue.

fluorescent pamamaraan

Sila ay batay sa mga katangian ng mga tiyak na mga bagay bigyan glow sa asul-lila na bahagi ng spectrum o UV ray. Maraming mga sangkap tulad ng mga protina, ang ilang mga bitamina, coenzyme, droga, endowed na may isang pangunahing (en) luminescence. Iba pang mga bagay magsimulang mamula sa pamamagitan ng pagdagdag ng isang fluorochrome - espesyal na dyes. Ang mga additives ay pili nagkakalat o ipinamahagi sa mga hiwalay na cellular istraktura o chemical compounds. Ang property na ito ay ang batayan ng paggamit ng fluorescent mikroskopya na may histochemical at cytological pag-aaral.

Mga lugar ng paggamit

Ang paggamit ng mga eksperto immuno-ilaw detect viral antigens at ang kanilang konsentrasyon nababagay ay nakilala virus anti katawan at antigens, hormones, iba't-ibang mga metabolic produkto at iba pa. Kaugnay nito, ang diagnosis ng herpes, mumps, hepatitis B, trangkaso at iba pang mga impeksyon gamit fluorescent pamamaraan ng mga materyales sa pananaliksik. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Microscopic immuno-fluorescent paraan ng nakikita tumor kapaniraan, matukoy ischemic lugar ng puso sa maagang yugto ng isang atake sa puso at iba pa.

Ang paggamit ng ultraviolet

Ito ay batay sa kakayahan ng isang bilang ng mga sangkap sa buhay na mga cell o microorganisms ay naayos, ngunit uncolored transparent ilalim ng nakikitang liwanag tela absorb UV rays ng isang tiyak na haba ng daluyong. Ito ay totoo lalo na para sa mataas na molekular compounds. Kabilang dito ang mga protina, aromatic acids (methylalanine, tryptophan, tyrosine, at iba pa), nucleic acids at purine base piramidinovye at iba pa. UV mikroskopya ay nagbibigay-daan upang tukuyin ang lokasyon at bilang ng mga compounds. Sa pag-aaral ng mga bagay na living propesyonal ay maaaring obserbahan ang mga pagbabago sa kanilang mga metabolic proseso.

Bukod pa rito

Infrared mikroskopya ay ginagamit sa pag-aaral ay opaque sa liwanag at ultraviolet rays sa pamamagitan ng pagsipsip ng mga bagay dumaloy istruktura na wavelength 750-1200 nm. Upang mag-apply ang pamamaraan na ito hindi na kailangan mag pre-ilantad ang mga gamot na kemikal paggamot. Karaniwan, ang IR paraan ay ginagamit sa antropolohiya, soolohiya at iba pang mga agham industriya. Tulad ng para sa gamot, ang paraan na ito ay ginagamit higit sa lahat sa ophthalmology at Neuromorphology. Ang pag-aaral na-dimensional na mga bagay sa pamamagitan ng paggamit ng stereoscopic mikroskopyo. hardware na disenyo ay nagbibigay-daan para sa pagsubaybay ng kaliwa at kanang mata sa isang iba't ibang mga anggulo. Opaque bagay ay investigated sa medyo mababa ang pag-magnify (120 beses sa pinakamadalas). Stereoscopic pamamaraan ay ginagamit sa microsurgery, Pathomorphology sa forensic gamot.

elektron mikroskopya

Ito ay ginagamit upang pag-aralan ang istraktura ng mga cell at tisiyu sa macromolecules at subcellular antas. Electron mikroskopya nagpahintulot sa amin upang makagawa ng isang lukso ng husay sa larangan ng pananaliksik. Ang pamamaraan na ito ay malawakang ginagamit sa byokimika, oncology, virology, morpolohiya, immunology, genetics, at iba pang mga patlang. Makabuluhang pagpapabuti ng ang resolution na ibinigay ng kagamitan kapasidad ng daloy ng mga electron na pumasa sa pamamagitan ng vacuum electromagnetic field. Ang huli, siya namang, lumikha ng mga espesyal na lenses. Electron ay magagawang upang pumasa sa pamamagitan ng mga istraktura ng bagay o masasalamin mula sa kanila na may mga deviations mula sa iba't ibang mga anggulo. Ang resulta ay ipinapakita sa fluorescent screen ng device. Kung transmission mikroskopya planar tingnan nakuha kapag ang pag-scan ayon sa pagkakabanggit palibutan.

Mga paunang kinakailangan

Ito ay nagkakahalaga ng pagpuna na sa harap ng pass electronic mikroskopiko pagsusuri, ang bagay ay subjected sa mga espesyal na pagsasanay. Sa partikular, ang paggamit ng pisikal o kemikal pagkapirmi ng tisiyu at organismo. Sectional biopsy materyal at, bilang karagdagan, dewatered, ay naka-embed sa epoxy dagta, i-cut glass o diamond knife sa mga seksyon ultrathin. Nang magkagayo'y ang kanilang contrast at pag-aaral. Ang scan mikroskopyo Sinusuri ang ibabaw ng mga bagay. Upang gawin ito, sila ay sprayed isang espesyal na sangkap sa silid vacuum.